ICS 11.020 C 61 Ws 中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 632—2018 巴贝虫检测血涂片镜检法 Detection of Babesia spp. -Blood smear microscopy examination method 行业标准信息服务平台 2018-09-26发布 2019-04-01实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会发布 WS/T632—2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家卫生标准委员会寄生虫病标准专业委员会提出。 本标准起草单位：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、第二军医大学、中国农业科学院上 海兽医研究所。 本标准起草人：张仪、周晓农、刘琴、陈韶红、朱淮民、周金林。 行业标准信息服务平台 I WS/T632-—2018 巴贝虫检测 血涂片镜检法 1范围 本标准规定了检测巴贝虫的血涂片镜检法。 本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对巴贝虫的检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 WS/T569疟原虫检测血涂片镜检法 WS/T564巴贝虫病诊断 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 巴贝虫Babesiaspp 一类寄生于人和脊椎动物红细胞内的原虫，可引起巴贝虫病（Babesiosis）。感染人体的巴贝虫有 田鼠巴贝虫(Babesiamicroti)、分歧巴贝虫(B.divergens)、邓肯巴贝虫(B.duncani)和猎户巴贝虫(B 行业标准 venatorum)等。 3. 2 血涂片blood smears 赠息服务平台 将血液涂制于载玻片上制成的涂片，分为厚血膜涂片和薄血膜涂片。 仪器和器材 4 4.1光学显微镜（100×油镜、10×目镜） 4. 2 血涂片染色架 4. 3 血涂片干燥架 4. 4 玻片盒 4.5 染色盘和染色缸 1 WS/T632—2018 4.6计数器 5试剂和材料 5.1 吉氏染色原液（Giemsa） 5. 2 pH7.2磷酸盐缓冲液（PBS） 5.3标准级载玻片（洁净载玻片，或表面带正电荷的粘附玻片） 5. 4 甲醇(分析纯) 5.5 香柏油或专用浸油（折射率≥1.5） 5.6 二甲苯（分析纯） 5.7甘油 6检测步骤 6.1血涂片的制作 6.1.1采血部位及取血方法 末梢（无名指指尖或耳垂）取血。用75%酒精棉球消毒取血部位，待酒精挥发后，用拇指和食指紧 捏耳垂上方或无名指指尖，另一只手手持一次性采血针迅速刺入皮肤，轻轻挤压出血。婴儿可从拇趾或 足跟扎刺取血。 6.1.2厚血膜制作 取1张已消毒的载玻片（或粘附玻片）作推片，用推片的一角，取4uL～5μL的血量，使血与另1 张平置的载玻片（或粘附玻片）中央偏右的位置接触，由里向外旋转，画2圈～4圈，涂成直径0.8cm～ 1cm大小圆形厚血膜（见附录A）。 6.1.3薄血膜制作 干棉球抹净推片下角的血渍，用同→张推片中部取约1μL~1.5μL的血量。将血置于离厚血膜左边 缘约0.3cm的位置，推片的边缘紧贴载玻片，上下轻轻移动，使血沿推片的边缘散开至2cm宽，使两 张玻片保持25°～35°角，从右向左迅速推动推片向前，推成舌状薄血膜（见附录A）。 6.1.4编号 血涂片制好后水平放置，充分干燥后，在玻片一侧毛玻璃上或在靠近厚血膜一端边上标注编号和日 期。 6.2固定与溶血 6.2.1薄血膜固定 将薄血膜一端朝下呈45°角，用一次性吸管吸取甲醇溶液，均匀轻抹于薄血膜表面，避免碰触厚血 膜。